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營養瓊脂有哪些用途

作者:標準菌株生產廠家 來源:www.idavxy.live 發布于:2015/3/10 13:49:24 點擊量:

培養基名稱:營養瓊脂(普通肉湯瓊脂培養基)

品種編號:022020

培養基英譯名稱:Nutrient Agar

培養基規格: 250g

營養瓊脂(用途:用于細菌總數測定、保存菌種及純培養,也可用于消毒效果測定。

營養瓊脂使用原理

蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。

配方(每升):

蛋白胨10g

牛肉膏粉3g

氯化鈉 5g

瓊脂15g

最終pH 7.3±0.2

 

營養瓊脂(使用方法

1、稱取營養瓊脂(33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至完全溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。

2、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。

3、根據對樣品污染情況的估計,選擇2—3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿。

4、稀釋液移入平皿后應及時將涼至46℃左右的培養基注入平皿約15mL,并轉動平皿使混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固后,倒置于36±1℃溫箱中培養48±2h。

5、觀察結果。

6、菌落計數方法:

做平板菌落計數時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,在計下各平板的菌落數后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。

7、菌落計數的報告:

選取菌落數在30—300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,應采用兩個平板平均數,其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數,若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數。平皿內如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈,則應將每條鏈視為一個菌落計

A:稀釋度的選擇:

應選擇平均菌落數在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之。

若有兩個稀釋度.其生長的菌落數無均在30—300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,則應報告其平均數;若大于2則報告其較小的數字。

若所有稀釋度的平均菌落數均大于300則應按稀釋度最高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。

若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度最底的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。

若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以最底稀釋倍數報告之。

若有稀釋度的平均菌菌落數均不在30—300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以最接近30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之。

 

菌落數的報告

菌落數在100以內時,按其實有數報告,大于100時,采用二位有效數字,在二位數字后面的有效數值,以四舍五入法計算。為了縮短數字后面的零數,也可以用10的指數來表示。

稀釋度選擇及菌落數報告方式

例次稀釋液及菌落數兩稀釋液之比菌落總數個/g或mL報告方式個/g或mL

10-110-210-3

1多不可計16420——16 40016 000或1.6×104

2多不可計295461.637 7503 8000或3.8×104

3多不可計271602.2 ——27 10027 000或2.7×104

4多不可計多不可計313 ——31 300 31 0000或3.1×105

527115 ——270270或2.7×102

6 000 ——<1×10<10

7多不可計30512——30 500 31 000或3.1×104

 

質量控制

本品接種下列菌株,置于36±1℃溫箱中培養48±2h,結果如下:

菌 名菌 號 生長狀況 菌落特征

大腸埃希氏菌ATCC25922良好白色—灰白色,圓形,邊緣整齊,表面光滑,濕潤。

金黃色葡萄球菌ATCC6538 良好 黃色,圓形,邊緣整齊,表面光滑、濕潤,不透明。

營養瓊脂貯存方法:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。




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